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DNS試劑(Ghose法) 的工作原理
更新時(shí)間:2026-07-28   點(diǎn)擊次數(shù):184次


信帆生物主營(yíng)產(chǎn)品: 質(zhì)控品,干擾物質(zhì),抗體抗原,elisa試劑盒,動(dòng)物血制品,生化試劑盒等。實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):HE染色/特殊染色/技術(shù)服務(wù)、免疫組化實(shí)驗(yàn)服務(wù)、Western blotting實(shí)驗(yàn)服務(wù)、RT-PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),QPCR(熒光定量PCR)、酶聯(lián)免疫ELISA、生化測(cè)試、液相氣相檢測(cè)等

【產(chǎn)品名稱(chēng)】:DNS試劑(Ghose法)                            

【產(chǎn)品規(guī)格】:500ml                         

【儲(chǔ)存條件】:2-8℃

【有效期】:12個(gè)月

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

Ghose法DNS試劑。又稱(chēng)3,5-二硝基水楊酸法或簡(jiǎn)稱(chēng)DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(cè)(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測(cè)植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量。

檢測(cè)原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸,3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物。在一定范圍內(nèi),還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系。在540nm處測(cè)定棕紅色物質(zhì)的吸光度,該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系。 

操作步驟(僅供參考): 1、 還原糖的提取:①稱(chēng)取植物樣品0.5~3g,剪碎,加入蒸餾水約3ml勻漿,轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次,洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。②50℃水浴30min,并不時(shí)攪拌,以便還原糖徹底浸出。③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50ml離心管,4000g離心5min。④留取上清液,向沉淀中加入20ml蒸餾水,混勻,再次4000g離心5min。

⑤留取上清液,將2次獲得的上清液合并,用蒸餾水定容至100ml(提取液),混勻,作為還原糖待測(cè)液。2、 總糖的水解和提取:①稱(chēng)取植物樣品0.5~3g,剪碎,加入蒸餾水約3ml勻漿,轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次,洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液,攪拌均勻,煮沸30min,并不時(shí)攪拌。③取2滴滴加于載玻片上,滴加1滴顯色液,檢查水解是否完全,如已經(jīng)水解完全則不顯示藍(lán)色。④水解完畢后,冷卻至室溫,加入6M氫氧化鈉溶液,使溶液pH至7.4左右,用蒸餾水定容至100ml,混勻,4000g離心5min或過(guò)濾,獲得上清或?yàn)V液。⑤取上清或?yàn)V液10ml,用蒸餾水定容至100ml,成稀釋10倍的總糖水解液(提取液),取1ml總糖水解液,測(cè)定其還原糖的含量。

 

注意事項(xiàng):

1、 該試劑避免反復(fù)凍融,以免失效或效率下降,盡量避光保存。

2、 稀釋鹽酸和氫氧化鈉溶液時(shí),應(yīng)小心操作,避免傷人。

3、 一般市售的濃鹽酸摩爾數(shù)約為11.6M,應(yīng)稀釋至6M后使用。

4、 待測(cè)樣本如不能及時(shí)測(cè)定,應(yīng)置于2~8℃保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。

5、 如果樣品還原糖濃度過(guò)高,應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè),結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

6、 總糖計(jì)算公式在測(cè)定干擾雜質(zhì)很少、還原糖含量相對(duì)總糖含量很少時(shí)使用,×0.9是為了從測(cè)定出的總糖水解成單糖中,扣除水解時(shí)所消耗的水量。


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