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信帆生物-酵母轉(zhuǎn)化試劑盒酵母感受態(tài)細胞的制備
更新時間:2020-05-11   點擊次數(shù):1371次

信帆生物-酵母轉(zhuǎn)化試劑盒酵母感受態(tài)細胞的制備

 

酵母感受態(tài)細胞的制備:

1.活化菌種。-80℃保存的菌種在固體YPDA培養(yǎng)基(YPDA加20g Agar/L)上劃線,在30℃培養(yǎng)2-4天。

2.挑取酵母單菌落在固體YPDA培養(yǎng)基上劃3-5 mm的duan線,在30 ℃培養(yǎng)2-4天。待酵母單菌落長至2 mm長時,接種。

3.首先把酵母細胞接種到3 ml液體YPDA培養(yǎng)基中,30℃過夜培養(yǎng)。

4.第二天轉(zhuǎn)接到含有30 ml液體YPDA培養(yǎng)基的三角瓶中繼續(xù)培養(yǎng),待OD600到0.4-0.5范圍內(nèi)。收集細胞,1000 g,離心5 min, 去上清。

5.沉淀用30-50 ml的無菌的去離子水懸浮。1000 g,離心5 min,去上清。

6.沉淀用合適體積的100 mM LiAc懸浮(30 ml的酵母菌zui多用不超過1 ml的100 mM LiAc懸浮,通常100 μl的酵母細胞用于轉(zhuǎn)化一個質(zhì)粒,即一個反應)。

7.把酵母細胞的懸浮液分裝到1.5 ml的離心管中,每管分裝100 μl,用于轉(zhuǎn)化一個質(zhì)粒即一個反應。1000 g,離心5 min,去上清。制備好的感受態(tài)細胞備用。

 

注意事項:

1. 初次使用Carrier DNA,請把裝有Carrier DNA的管子在沸水中煮沸5 min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃儲存?zhèn)溆谩O麓问褂脮r請在冰上解凍Carrier DNA。

2. PEG溶液在低溫環(huán)境下會析出,請于常溫環(huán)境下*溶解后使用。

3. 轉(zhuǎn)化全程要無菌操作。

 

信帆生物公司主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:進口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進口試劑。

標準品對照品:進口對照品,進口對照藥材,進口標準品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免試劑盒:進口放免試劑盒,國產(chǎn)放免試劑盒,進口美國鳳凰等放免試劑盒。
實驗室代測服務:放免代測,WB實驗,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細胞染色代測,生化實驗代測等。

 

信帆生物-酵母轉(zhuǎn)化試劑盒酵母感受態(tài)細胞的制備

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